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非洲绿猴IFITM3基因的克隆及其组织特异性表达差异

2020年05月20日 浏览量: 评论(0) 来源:中国比较医学杂志2020年第4期 作者:邢焕微 叶莉 李昌 张素花 白杰英 责任编辑:admin
摘要:为研究非洲绿猴(African green monkeys, AGM) 干扰素诱导跨膜蛋白 3( interferon-induced transmembrane protein,IFITMs)的功能,以及其发挥抗病毒作用的机制及作用方式,从非洲绿猴的不同组织器官中克隆了 IFITM3 基因,并对基因的表达特性进行了分析。

目的    为研究非洲绿猴(African green monkeys, AGM) 干扰素诱导跨膜蛋白 3( interferon-induced transmembrane protein,IFITMs)的功能,以及其发挥抗病毒作用的机制及作用方式,从非洲绿猴的不同组织器官中克隆了 IFITM3 基因,并对基因的表达特性进行了分析。


方法    用 RT-PCR 方法从非洲绿猴的心、肝、肺、肾、脑等组织器官中克隆 IFITM3 的全长 cDNA。用 DNAMAN 软件比较不同物种来源 IFITM3 cDNA 的核苷酸差异,对 AGM IFITM3 的遗传多样性进行分析,用实时荧光定量 PCR(Real-time PCR)检测了非洲绿猴各组织器官中 IFITM3 基因的表达情况,用病理学和免疫组化方法,检测非洲绿猴不同组织器官中 IFITM3 蛋白的表达差异。


结果    非洲绿猴的淋巴细胞、皮肤、心脏、脑、肝、肾、肺和脾中均检测到 IFITM3 的表达,所获 IFITM3 cDNA 大约为 440bp(442~448bp),在基因 进化方面与猕猴的相似性达到 93%。软件预测 AGM IFITM3 蛋白含有高度保守的五个跨膜结构域和特异性位点。Real-time PCR 结果显示,非洲绿猴 IFITM3 基因在脾中的表达量最高,在脑中表达量最低,而免疫组化结果显示,皮脂腺、脾和淋巴细胞中 IFITM3 蛋白含量最高,而脑组织、肺部等蛋白含量较低。


结论    基于 IFITM3 在非洲绿猴组织器官中的广泛存在,并在其重要免疫器官脾和淋巴中的高丰度表达,推测 IFITM3 在非洲绿猴健全的免疫系统和较强的 免疫能力建成过程中发挥着重要作用,与非洲绿猴对重要人兽共患病毒感染的免疫力和适应性有重要关系。


阅读原文:非洲绿猴 IFITM3 基因的克隆及其组织特异性表达差异.pdf



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