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模型制备

惊厥动物模型

2020年06月15日 浏览量: 评论(0) 来源:《常用医药研究动物模型》 作者:主编 苗明三 朱飞鹏 责任编辑:yjcadmin

(一)戊四氮致惊厥模型

1.造模材料  动物:昆明种小鼠,体重18~22g,雌雄兼用,或大鼠;药物:戊四氮(pentetrazole, PTZ)。

2.造模方法  造模组小鼠腹腔注射戊四氮90mg/kg。对照组等量注射生理盐水。或大鼠肌内注射戊四氮112mg/kg,或皮下注射110mg/kg,以全身阵挛性惊厥为指标,一般给戊四氮后观察60min。

3.造模原理  戊四氮主要作用于脑干及大脑,使兴奋性突触的易化过程增强而引起惊厥发作。在阈剂量时,能使动物发生阵挛性抽搐,是常用的致惊厥剂。

4.造模后的变化  以后肢伸直为指标,可观察到小鼠发生惊厥(大发作),阵挛潜伏期为(17.3±7.6)s。

5.注意事项  本实验与动物品系有关,不同种系小鼠持续惊厥后死亡发生率差异较大,实验时应予注意;部分动物在阵挛性惊厥后,可发生强直性惊厥以至死亡。

(二)戊四氮慢性点燃大鼠惊厥模型

1.造模材料  动物:SD雄性大鼠,体重(200±20)g;药物:戊四氮。

2.造模方法  SD雄性大鼠,体重(200±20)g,隔天一次腹腔注射PTZ 35mg/kg,持续28天,停药1周后,用相同剂量PTZ测试。

3.造模原理  戊四氮兴奋脑干嘴侧区及大脑导致动物惊厥。

4.造模后的变化  造模后,凡显示连续5次2级以上惊厥的大鼠为点燃大鼠。大鼠惊厥行为评分标准:0级,没有行为上的发作;1级,节律性点头或头部颤搐;2级,阵挛性咀嚼;3级,头部颤搐加前肢阵挛性抽搐;4级,袋鼠姿势(上身直立);5级,跌倒;6级,强直性惊厥。

(三)士的宁致小鼠惊厥模型

1.造模材料  动物:昆明种小鼠,体重18~22g,雌雄兼用;药物:硝酸士的宁注射液。

2.造模方法  造模组小鼠腹腔注射硝酸士的宁注射液1.5mg/kg。对照组注射等量生理盐水。

3.造模原理  士的宁是脊髓抑制性神经元甘氨酸受体的拮抗剂,可选择性的兴奋脊髓,大剂量腹腔注射使动物产生癫痫样强直性惊厥。

4.造模后的变化  造模后可观察到小鼠发生强直性惊厥,潜伏期(5.1±1.0)min,惊厥率100%,死亡时间(6.8±2.6)min,死亡率100%。

(四)电刺激导致小鼠惊厥模型

1.造模材料  动物:昆明种小鼠,体重18~22g,雌雄兼用;器械:YSD-5型药理、生理实验多用仪。

2.造模方法  取小鼠用YSD-5型药理生理实验多用仪进行电刺激。刺激方式:单次;间隔:300ms;电压调节旋钮固定在7.5格(100V)。以后肢发生强直性惊厥为合格。

3.造模原理  电刺激导致小鼠惊厥。

4.造模后的变化  电刺激后动物发生强直性惊厥。

(五)发育期大鼠高热惊厥模型

1.造模材料  动物:21天龄SD大鼠,体重60~100g,雌雄兼用;器械:热水浴。

2.造模方法  热水浴箱内(44.5℃)的水深以大鼠沿箱壁站立时仅露出头部为准,大鼠在水中5min如不惊厥则取出,5min内发生惊厥者则惊厥开始时即取出。隔日诱导惊厥1次,共诱导10次,末次诱导后24h处死大鼠。

3.造模原理  采用热水浴诱导大鼠高热惊厥。

4.造模后的变化  HE染色结果:正常对照组大鼠海马CA1区、CA2区细胞排列整齐、极向好、染色均匀,细胞核大小一致、长椭圆形。造模组大鼠海马CA1区、CA2区细胞排列紊乱、极向不清、细胞空泡变,细胞核大小不一致、呈圆形或椭圆形。

大鼠海马CA1区及门区神经元超微结构改变:正常对照组大鼠海马CA1区及门区神经元细胞规则,基质均匀,线粒体呈椭圆形,大小正常,嵴规则,粗面内质网及核糖体结构清楚,核膜平滑,核圆形,常染色体分布均匀,核仁清楚。造模组大鼠海马CA1区及门区神经元线粒体体积小,基质浓缩,嵴模糊不清,甚至消失,有的线粒体出现空泡、畸形,高尔基复合体轻中度扩张,结构不清。

(六)听源性致惊厥模型

1.造模材料  动物:大鼠,雌雄兼用;器械:隔音箱,电铃。

2.造模方法  选用听源性发作敏感的大鼠,以电铃刺激60s(或90s)能产生奔跑或惊厥者为实验对象。以后每天以相同条件刺激一次,连续3~5天,反应恒定者作为模型用于实验。

3.造模原理  强烈的铃声刺激,造成听觉中枢过度兴奋,而后扩散到邻近的运动中枢,使某些敏感动物产生一种定型的运动性发作。

4.造模后的变化  电铃刺激时动物出现惊厥。

5.注意事项  实验前应对试验大鼠对铃声的反应性进行筛选,实验条件必须严格控制,每次刺激控制条件应一致。

(七)氨基脲致小鼠惊厥模型

1.造模材料  动物:昆明种小鼠,体重(22±2)g,雌雄兼用;药物:氨基脲。

2.造模方法  将氨基脲150mg/kg尾静脉注射,注射容积0.01ml/g,注射时间8s。以出现狂奔和后肢强直为惊厥发作。

3.造模原理  硫代氨基脲是谷氨酸脱羧酶抑制剂,抑制谷氨酸生成γ-氨基丁酸(gam-ma-aminobutyric acid, GABA),使GABA合成减少,脑内GABA水平下降可引起惊厥。

4.造模后的变化  注射后,造模动物出现狂奔和后肢强直,潜伏期为(49.3±11.6) min,存活时间为(59.3±23.4)min。


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