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树鼬连接黏附分子A的基因克隆及初步功能研究

2021年02月04日 浏览量: 评论(0) 来源:《实验动物与比较医学》2020年第3期 作者:李晓飞 孙晓梅 王文广 匡德宣 陆彩霞 全品芬 罕园园 李娜 代解杰 责任编辑:admin
摘要:获取树鼬连接黏附分子A(junctional adhesion molecule A JAM-A)的全长编码序列并进行分子特征分析,探讨JAM-A作为呼肠孤病毒受体入侵树晌原代肺细胞的作用机制。

目的 获取树鼬连接黏附分子A(junctional adhesion molecule A JAM-A)的全长编码序列并进行分子特征分析,探讨JAM-A作为呼肠孤病毒受体入侵树晌原代肺细胞的作用机制。


方法 提取健康树鼬组织总RNA,采用反转录PCR和cDNA末端快速克隆技术获取JAM-4基因; Unipro UGENE分析编码氨基酸,使用MEGA6.0软件最大似然法构建系统发育树;实时荧光定量PCR检测JAM-A在树剿25个组织和血液中的表达分布情况;于树购原代肺上皮细胞上进行受体的特异性抗体阻断处理,然后采用免疫荧光法观察病毒抗原对呼肠孤病毒感染的影响。


结果 获取了JAM-A基因cDNA全长序列,2962bp;系统发育树进化分析显示JAM-4基因与人的亲缘关系较啮齿类更近;JAM-A分子广泛表达于树剿的外周组织,而在呼吸道和消化道表达水平更高。特异性抗体作用于细胞显著降低病毒抗原的免疫荧光积分吸光度值(P<0.0001)。


结论 首次克隆并分析了JAM-A的基因序列,验证JAM-A分子是呼肠孤病毒入侵树删的主要受体,提示树晌可作为一种新的呼肠孤病毒动物模型。


阅读原文:树鼬连接黏附分子A的基因克隆及初步功能研究.pdf


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