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疾病与药物研究

miR-335-5P调控的TGF-β通路介导妊娠糖尿病小鼠胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌的实验研究

2021年02月09日 浏览量: 评论(0) 来源:中国比较医学杂志2020年第12期 作者:刘洁 温学娜 冯英 李元元 刘永莉 责任编辑:yjcadmin
摘要:使用miR-335-5P和转化因子-β(TGF-β)处理妊娠期糖尿病(GDM)小鼠,明确 miR-335-5P调控TGF-β通路参与促进胰岛β细胞分泌和增强胰岛素抵抗机制,为治疗GDM患者开辟新道路。

目的    使用miR-335-5P和转化因子-β(TGF-β)处理妊娠期糖尿病(GDM)小鼠,明确 miR-335-5P调控TGF-β通路参与促进胰岛β细胞分泌和增强胰岛素抵抗机制,为治疗GDM患者开辟新道路。


方法    SPF级Balb/c小鼠以雌性和雄性小鼠 2 ∶1合笼饲养,10只正常妊娠小鼠作为空白组,48只成功构建GDM模型的小鼠作为GDM组并随机分成 A、B、C、D、E、F组,每组各8只小鼠。 A组(模型组)、B组(模型组+溶媒)、C组(模型组+miR- 335-5P 模拟物)、D组(模型组+miR-335-5P抑制剂)、E组(模型组+si-TGF-β)、F组(模型组+miR-335-5P抑制剂+si-TGF-β)。 药物处理后行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FIRI),计算稳态模型 胰岛素抵抗指数(IRI);进行高血糖钳夹试验测定葡萄糖输注速率(GIR),估计胰岛β细胞功能;采用RT-qPCR、蛋白质印迹分析和ELISA胰岛素释放测定胰岛β细胞中 miR-335-5P、TGF-β 通路关键因子 mRNA 水平。


结果    D、F组 FBG、FIRI、IRI 低于给药前低于C、E组(P<0. 05);D、F组 GIR、第一时相胰岛素、最大胰岛素高于给药前高于C、 E 组(P<0. 05);D、F组 miR-335-5P、TGF-β、c-Myc表达低于C、E组低于 A、B 组(P<0. 05);在胰岛β细胞中检测到 miR-335-5P表达时,TGF-β、c-Myc 均有不同程度的表达;TGF-β在胰岛β细胞胞质内表达,且D、F组 TGF-β 表达高于 C、E组高于 A、B组(P<0.05)。


结论    miR-335-5P可上调GDM小鼠c-Myc表达,进一步激活TGF-β通路,增强胰岛素抵抗并抑制胰岛β细胞分泌。


阅读原文:miR-335-5P调控的TGF-β通路介导妊娠糖尿病小鼠胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌的实验研究.pdf



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