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模型制备

创伤后应激障碍(PTSD)动物模型(Model of posttraumatic stress disorder)

2018年12月03日 浏览量: 评论(0) 来源:《实验动物血液生理生化参考手册》 作者:王冬平、曾林、尚世臣 主编 责任编辑:yjcadmin
摘要:创伤后应激障碍是对严重应激因素的一种异常精神反应,可由战争、社会暴力事件、重大交通事故和自然灾害等创伤意外引起。其临床表现多样化,主要包括创伤经历的再体验、情感麻木与回避行为、警觉增高所致的易激惹等症候。

创伤后应激障碍是对严重应激因素的一种异常精神反应,可由战争、社会暴力事件、重大交通事故和自然灾害等创伤意外引起。其临床表现多样化,主要包括创伤经历的再体验、情感麻木与回避行为、警觉增高所致的易激惹等症候。

1 电刺激大鼠海马模型(Model of stimulating hippocampus of rats by electricity)

(1)复制方法  健康大鼠,雌雄不拘,体重为200~220g。

1)埋植电极及电刺激  大鼠经腹腔注射戊巴比妥钠(按50~60mg/kg体重的剂量)或水合氯醛(按350~400mg/kg体重的剂量)麻醉后固定于立体定位仪上,剪除头顶部毛发,手术区域常规消毒,按大鼠脑图谱确定海马CA1区,无菌操作。牙科钻于前囟后4.5mm、旁开5.0mm钻孔,将双极漆包不锈钢电极(直径为0.2mm,尖距为0.1mm)埋植于海马CA1区(硬脑膜下5.5mm)。牙科水泥固定电极,术后连续肌肉注射庆大霉素5d,每只2万U/d。动物恢复1周后开始实验。电刺激参数:波宽为1ms、频率为25Hz、串长为10s、刺激强度为100μA、恒流、单向方波,每天刺激8次,串隔7min,连续刺激5d。

2)行为学观察  观察最后一次电刺激停止后1d、1周及1个月时动物情感行为改变。

惊吓反应:观察动物接受反复、短暂(1~2s)高频金属音刺激后行为习性、自主活动及适应能力的变化。

旷场活动性:将大鼠轻轻放入旷场行为观察箱(60cm×60cm×60cm的无顶木盒,箱底用墨线分成36个相等的方格)中央小方格内,观测30s内动物的活动情况。计分标准:大鼠1/2以上身体从所在方格进入相邻方格计1分;大鼠后肢性站立计1分;二者相加为其所得总分。

拒俘反应性:以动物从未接触过的手套轻抓大鼠,观察其反应。记分标准:0:很容易抓取动物;1:尖叫或回避;2:尖叫并回避;3:逃脱;4:逃脱并尖叫;5:咬或试图撕咬手套;6:主动跃起攻击。

3)动物行为学变化

惊吓反应观察:短暂高频金属音刺激时,对照组动物出现1~3s的轻微惊吓反射,重复3次以上同样刺激后很快适应。电刺激组动物在电刺激停止后1个月内,以同样高频金属音刺激时出现明显的惊吓反应,表现为全身性惊吓反射、反应幅度增大,持续时间长(5~10s),并出现打洞、埋头、趋暗性等多种躲藏、逃避性焦虑样行为,且对刺激的适应时间明显延长,反复刺激6~10次后仍有较明显的惊吓反应。

情感行为观察:电刺激停止后1个月内电刺激组动物旷场活动性较对照组明显减少,拒俘反应性则显著增强。

(2)模型特点  此模型以海马CA1区为诱发部位,通过重复电刺激,诱发与PTSD临床表现相似的情感行为障碍。实验中,要求所施电刺激既可诱发海马后放电,以最大限度地引发实验动物情感行为异常,同时又控制其持续时间在一定限度内,尽量减少实验中可能出现惊厥行为及其他影响因素。另外,一定数量的电刺激累积对产生明显、持续的情感行为障碍至关重要。

(3)比较医学  此模型中通过重复电刺激海马CA1区,诱发了实验动物明显的、较长时程的活动习性改变、警觉水平增高、惊恐行为、环境适应能力下降、躲藏逃避反应等多种与人类的PTSD相似的精神、行为异常表现。这显示了该模型稳定性好,诱发率高,效应持久,对动物损害较小,可基本再现PTSD的主要临床症状。

2 加强捕食应激模型(Model of intensive predator stress)

(1)复制方法  健康大鼠,雌雄不拘,体重为200~220g。

1)模型制备  将鼠放入捕食应激实验箱(1m×1m×1m铁丝笼,中间固定一个20cm×20cm×20cm的小铁丝笼,以便在实验中将鼠放入其中,笼中设一蜂鸣器)的小笼中,在蜂鸣器鸣叫的同时将一只饥饿的猫放入实验箱中,使猫与鼠无生理伤害性接触10min后将猫取出。在单纯捕食应激后1周时重复上述过程,但蜂鸣后不再放入猫,将鼠在实验笼中静置5min。

2)行为学观察  观察捕食应激后第3日、第2周及第1个月时行为改变。包括:惊吓反应,旷场活动性和拒俘反应性。

(2)模型特点  动物在1个月内,在受到同样高频金属音刺激时均出现明显的惊吓反应,表现为全身性惊吓反射、反应幅度增大、持续时间长(5~10s),并出现打洞、埋头、趋暗性等多种躲藏和逃避性焦虑样行为,且对刺激的适应时间明显延长,在反复刺激6~10次后仍有较明显惊吓反应。旷场活动性减少,拒俘反应性则增强。

(3)比较医学  利用动物食物链中特殊的捕食关系,观察严重心理应激对鼠的行为及空间学习记忆能力的影响。本模型通过加强捕食应激,诱发了动物明显和较长时程的活动习性改变、警觉水平过高、惊恐行为、环境适应能力下降、躲藏逃避反应等多种精神和行为的异常表现。这显示本模型具有与PTSD相似的致病因素与过程,诱发效应持久,可基本满足其主要临床表现,不失为进一步研究PTSD致病机制的较理想的动物实验模型。

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