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模型制备

平台睡眠剥夺技术(platform technique)

2019年02月13日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin
摘要:平台睡眠剥夺的原理是利用大鼠畏水及在水中无法进入睡眠的生活习性,通过在盛水的水槽中放置平台让大鼠站立在平台上,因平台直径足够小(≤6.5cm),当大鼠进入睡眠状态时,因全身肌张力降低引起节律性低头(触水),以此来达到剥夺睡眠的目的。此模型简单易行,无需复杂昂贵的设备,在不同条件的实验室均能开展,因而应用广泛。雌、雄性大鼠皆可,体重为180~220g。

平台睡眠剥夺的原理是利用大鼠畏水及在水中无法进入睡眠的生活习性,通过在盛水的水槽中放置平台让大鼠站立在平台上,因平台直径足够小(≤6.5cm),当大鼠进入睡眠状态时,因全身肌张力降低引起节律性低头(触水),以此来达到剥夺睡眠的目的。此模型简单易行,无需复杂昂贵的设备,在不同条件的实验室均能开展,因而应用广泛。雌、雄性大鼠皆可,体重为180~220g。

1 单平台睡眠剥夺法(single platform method, SP)

(1)复制方法  将一圆柱形小平台(直径约6.5cm),放置在40cm× 34cm×16cm的水槽中,往水槽中加水至平台露出水面约1cm。将1只大鼠置于小平台上,大鼠可在平台上站立并可进入非快动眼运动睡眠(NREM),当大鼠进入快动眼运动睡眠(REM)时,全身骨骼肌张力明显降低,颈部肌张力降低引起节律性低头(触水),从而无法进入REM。

(2)模型特点  采用SP实验可引起动物的体重及胸腺重量减轻,肾上腺重量增加,血浆中肾上腺皮质酮(CORT)增高,动物攻击行为增加,机体免疫反应抑制等现象。此模型尚有大鼠与群体分离以及活动空间受限的不足之处。

2 多平台睡眠剥夺法(multiple platform method, MP)

(1)复制方法  在MP中为了扩展大鼠的活动空间将小平台由SP中的1个增加至7个,仍将1只大鼠放在小平台间进行睡眠剥夺试验。因大鼠可以在7个小平台间自由活动故活动范围较SP中有明显增大。

(2)模型特点  此法是为了克服SP中活动空间受限的缺点在SP基础上发展而来。经实验比较在MP中反映应激增强的一些指标如肾上腺重量增加和胸腺重量减少仍然存在,甚至在大鼠血液中ACTH、CORT的增加及肾上腺重量的增加较SP模型更高,提示MP较SP有更强的应激性。

3 改良多平台睡眠剥夺法(modified multiple platform, MMP)

(1)复制方法  此法是为了克服群体隔离所带来的应激反应,在MP法上进一步改良而来。在MMP中将10只大鼠(具体数目可根据实际需要确定)同时放在装有14~15个小平台的水槽中(127cm×44cm×45cm)进行实验,这样既避免了SP,MP中单只大鼠与群体隔离的缺点,又保留了 MP中活动范围增大的特点。若于睡眠剥夺实验前将实验所需的10只大鼠放在同一只笼中饲养2周,实验时再将这些大鼠放在一起同时进行睡眠剥夺实验,这样可以克服实验时大鼠群体不稳定的缺点,从而将实验时的不确定因素减至最低。

(2)模型特点  在MMP中采取保持大鼠群体稳定性及避免大鼠与群体分离的措施后,大鼠的肾上腺重量,体重减轻量,血清中促肾上腺皮质激素(ACTH)和肾上腺皮质酮(CORT)的含量均较MP中为低,提示MMP较MP具有更低的应激性,是较为理想的睡眠剥夺方法。

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