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实验方法

急性脑积水

2019年06月04日 浏览量: 评论(0) 来源:《常见人类疾病动物模型的制备方法》 作者:秦川 责任编辑:yjcadmin

【材料与试剂】外科手术器械、麻醉剂、固定器、硅胶、抗生素、止痛剂、造影剂、测压计、MR影像设备等。

【操作步骤】3%戊巴比妥钠45mg/kg腹腔注射麻醉,犬头用定向固定器固定在上矢状窦伸展位,犬颈部屈曲。暴露后枕部的硬脑膜,血管套管从中线部位朝向第四脑室插入。进入2~3mm后取出探针,导管继续进入约2cm,使其尖端位于第四脑室头侧的中部。缓慢注入0.3~0.4ml的硅胶填充第四脑室并扩展至导水管。硅胶多聚化的时间大约为5min。随后缝合伤口,给动物注射抗生素(头孢呋辛10~12mg/kg,肌注,3~4次/天)和止痛剂(0.1%盐酸丁卡因10ml/kg,肌注)。然后,在侧脑室内测定脑脊液的压力。测压后,以0.1ml的0.5mol/L的二甲葡胺酯注入犬的侧脑室。30min后由MR测定硅胶阻塞的程度。

【注意事项】外科手术操作的准确性和MR影像设备监测准确性。

【结果分析】与其他方法相比较,第四脑室硅胶注射造模的操作简单且无并发症。这种脑积水模型是急性阻断脑脊液流经第四脑室和导水管的正常环流途径。在脑脊液压力和容量方面造成的变化容易被监测。

另外Margolis Kilham曾通过在胎猴脑内接种流感病毒A弱毒疫苗的方法获得先天性脑积水疾病模型。具体做法是:选择妊娠100~105d的母猴,在胎猴脑内接种0.25ml流感A/HK/68-Its1E弱毒疫苗,妊娠期满后剖腹取胎,获得先天性脑积水疾病模型的动物。接种前需证实母猴对流感病毒A呈阴性血清反应。接种后通过母体和脐带血的血清学检查判定感染情况,并取胎盘或胎儿组织作病毒培养,接种11d后可在羊膜液和胎儿的多种脏器中发现减毒病毒,胎儿特异性血凝抑制抗体滴度增高。受感染的胎儿几乎都有脑积水,侧脑室后角的病变最为严重,第三脑室轻度扩张,但一般不会影响到第四脑室,导水管无阻塞现象。除流感病毒A外,副流感病毒-Ⅱ、呼肠孤病毒-Ⅰ、Ross River病毒和新城疫病毒疫苗都可引起动物的导水管狭窄,发生阻塞性脑积水。

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