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Fancm 基因敲除小鼠构建及其表型分析

2019年07月03日 浏览量: 评论(0) 来源:中国实验动物学报2019年第3期 作者:杨桥 郭红刚 楼琦 柯贤福 周文伟 应华忠 俞冰 张婷婷 责任编辑:admin
摘要:构建范可尼贫血通路Fancm 基因敲除小鼠,研究Fancm 基因缺失对小鼠生理功能,特别是雄 性生殖器官的影响。

目的:构建范可尼贫血通路Fancm 基因敲除小鼠,研究Fancm 基因缺失对小鼠生理功能,特别是雄 性生殖器官的影响。

方法:采用CRISPR/Cas9技术,获得 Fancm 基因敲除小鼠。 分析FANCM蛋白在野生型和 Fancm-/-小鼠睾丸组织中的表达。 统计 Fancm-/-小鼠的出生率、体重、性别比例及子代生育情况,分析血液常规指 标。 组织形态学研究雄性 Fancm-/-小鼠睾丸生理病理表型。

结果:敲除 Fancm 基因ATG区域,获得稳定遗传的 C57BL/6背景 Fancm-/-小鼠。 Fancm-/-小鼠睾丸中FANCM蛋白表达完全丢失。 Fancm-/-小鼠无明显的胚胎致死 现象,但雌性 Fancm-/-小鼠数目显著少于雄性 Fancm-/-小鼠。 同窝 Fancm-/-小鼠比较野生型体重无明显区别,部 分血常规指标有显著性差异。 Fancm-/-小鼠有明显的生殖能力缺陷。 雄性 Fancm-/-小鼠睾丸有显著的发育缺陷, 其生精细胞凋亡增加、细胞周期阻滞,影响睾丸发育与精子的生成。

结论:成功获得稳定遗传 C57BL/6 背景 Fancm-/-小鼠,Fancm 基因参与小鼠的生长发育,特别是雄性生殖器官功能的维持及调控。

全文阅读:Fancm 基因敲除小鼠构建及其表型分析

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