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TALEN技术制备基因敲除小鼠

  • 价格面议
  • 所在地:上海市闵行区
  • 供货总量:次
  • 更新时间:2018-11-26
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一、技术原理

    TALEN(transcription activator-like (TAL) effector nucleases)靶向基因敲除技术是一种崭新的分子生物学工具。研究发现,植物细菌Xanthomonas sp.的TAL蛋白的核酸结合域的氨基酸序列与其靶位点的核酸序列有恒定的对应关系。利用TAL的序列模块,可组装识别任意DNA序列的模块化蛋白和重组核酸酶,在特定位点打断目的基因DNA序列,进而在该位点进行DNA操作,如Knock-out、Knock-in或点突变。该技术克服了ZFN方法不能识别任意目标基因序列,以及识别序列经常受上下游序列影响等问题,从而使基因敲除变得更加简单方便。目前已成功的应用到细胞、酵母、植物、斑马鱼、小鼠、大鼠等模式生物中,大大缩减项目的研究周期。

二、TALEN技术特点
 

1、无基因序列、品系限制,几乎可敲除任意基因。
2、实验设计简单准确、实验周期短、成本低。
3、毒性低、脱靶情况少;成功率几乎可达100%。
4、TAL的核酸识别单元与A、G、C、T有恒定的对应关系。
5、可识别任意目标基因序列,且不受上下游序列影响,具有ZFN相等或更好的活性。
 
 
三、服务流程及周期 
 
1、TALEN质粒构建、活性检测、显微注射、Founder检测
2、提供3只以上F1代小鼠
3、Fouder仅需2个月、F1代最快仅需4个月 
 
获得F1代杂合子小鼠后,完成基因敲除PCR鉴定,提供不少于3只F1代杂合子小鼠,通知委托方领取小鼠。

四、部分成功案例
 
基因 品系 KO/KI 方法
Lepr C57BL/6 KO TALEN
Lepr FVB/N KO TALEN
Pak1ip1 C57BL/6 KO TALEN
Gpr55 FVB/N KO TALEN
Rprm C57BL/6 KO TALEN
Fbxo6 C57BL/6 KO TALEN
Smurf1 C57BL/6 KO TALEN
Tmem74 C57BL/6 KO TALEN
Wdr20a C57BL/6 KO TALEN
Dcaf13 C57BL/6 KO TALEN
Fam73a C57BL/6 KO TALEN
Th FVB/N KO CRISPR-Cas
Th B6 KO CRISPR-Cas
Rheb B6 KO CRISPR-Cas
Uhrf2 FVB/N KO CRISPR-Cas
Mc3r Sprague-Dawley KO CRISPR-Cas
Mc4r Sprague-Dawley KO CRISPR-Cas
Lepr Sprague-Dawley KO CRISPR-Cas

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